指人工配制適合于微生物生長繁殖所需要的營養(yǎng)基質(zhì)的技能。培養(yǎng)基用于微生物的分離、培養(yǎng)、鑒定、保藏等。制備生物培養(yǎng)基是微生物實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)，是生物教師應(yīng)該掌握的基本技能之一。培養(yǎng)基成分根據(jù)微生物營養(yǎng)需要而不同，一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、礦質(zhì)元素和水等，按所用原料不同可分為天然培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)基兩類。用肉湯、馬鈴薯汁等天然成分配成的稱天然培養(yǎng)基。用化學(xué)藥品配成并標(biāo)明成分的稱合成培養(yǎng)基。根據(jù)培養(yǎng)基中是否加入凝固劑，可分為固體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基等。制備固體培養(yǎng)基要在液體培養(yǎng)基中加入1.5—2%的瓊脂，制備半固體培養(yǎng)基則加入0.2—0.5%的瓊脂。
運(yùn)用制備生物培養(yǎng)基的基本步驟和要求是：第一步稱量。要根據(jù)培養(yǎng)基的配方，準(zhǔn)確稱量各種成分的原料，并放入燒懷中。第二步加熱溶解。加凝固劑(瓊脂)的培養(yǎng)基，要加熱至瓊脂溶化，并不時(shí)攪拌，以防糊底。第三步調(diào)pH值。用pH試紙或酸度計(jì)測試后，用10%氫氧化鈉或10%鹽酸調(diào)pH值至所需范圍。第四步過濾分裝。要用濾紙或多層紗布趁熱過濾，并根據(jù)需要分裝在試管中或三角瓶中，塞上棉塞。液體培養(yǎng)基分裝高度以試管高度的1/4為宜；固體培養(yǎng)基分裝試管為管高的1/5,滅菌后制成斜面；分裝三角瓶的容量以不超過三角瓶容積之一半為宜；半固體分裝試管以試管高度1/3為宜，滅菌后，垂直待凝固成半固體深層瓊脂。第五步滅菌。要將分裝好的培養(yǎng)基按照不同類培養(yǎng)基的規(guī)定，進(jìn)行滅菌，滅菌后放在37℃室溫中培養(yǎng)24小時(shí)，無菌生長方可使用。運(yùn)用制備生物培養(yǎng)基的技能必須注意：①制備培養(yǎng)基前要準(zhǔn)備好合乎要求的清潔的玻璃器皿和制備培養(yǎng)基的原料。②要了解不同種類微生物培養(yǎng)基的配方和滅菌要求。如肉湯蛋白胨培養(yǎng)基(細(xì)菌培養(yǎng)基)、牛肉膏3克、蛋白胨10克、食鹽5克、瓊脂15—20克、水1000毫升、pH7.0—7.2高壓滅菌20鐘；高氏一號培養(yǎng)基(放線菌培養(yǎng)基),可溶性淀粉20克、硝酸鉀1克、食鹽0.5克、磷酸一氫鉀0.5克、硫酸鎂0.5克、硫酸鐵0.01克、瓊脂15—20克、水1000毫升，pH7.2—7.4,高壓滅菌20分鐘；黃豆芽汁萄萄糖液培養(yǎng)基(真菌培養(yǎng)基):黃豆芽100克(煮成豆芽汁)、葡萄糖50克、瓊脂15—20克、水1000毫升，高壓滅菌20分鐘，pH自然。③欲制斜面培養(yǎng)基，要將滅菌后的瓊脂培養(yǎng)基趁熱置于玻璃棒或小木條上，使培養(yǎng)基為試管長度一半，呈適當(dāng)斜面，勿使斜面沾浸棉塞。如圖3—9—2所示。

圖3—9—2