指在微生物培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，進(jìn)行滅菌(殺滅一定環(huán)境中所有的微生物)和消毒(消滅病原菌或有害微生物)的技能。微生物培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)，各項(xiàng)操作均需在無菌的條件下進(jìn)行，滅菌與消毒是微生物實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)，是生物教師應(yīng)掌握的基本技能之一。滅菌與消毒的方法很多，可以分為物理法和化學(xué)法兩大類。物理的方法包括：加熱滅菌、過濾除菌、紫外線滅菌等?；瘜W(xué)方法主要是利用福爾馬林、酒精、石炭酸、來蘇爾等有機(jī)或無機(jī)的化學(xué)藥品對(duì)實(shí)驗(yàn)室用具或其它物體進(jìn)行滅菌與消毒。
運(yùn)用加熱滅菌的基本方法和要求是：①高壓蒸汽滅菌法：為濕熱滅菌法之一，是微生物實(shí)驗(yàn)中常用的一種滅菌法。用熱蒸汽加壓至1公斤/厘米²或15磅/英寸²(約121℃)持續(xù)15—30分鐘，即可殺死一切微生物及其芽孢。一般培養(yǎng)基、玻璃器皿及傳染性標(biāo)本等都可以用此法滅菌。操作要求是：打開滅菌鍋蓋(用壓力鍋代替也行),加入適量水，將滅菌物品放入鍋內(nèi)，關(guān)嚴(yán)滅菌鍋蓋，使蒸汽鍋密閉，打開放氣活塞，加熱至開始產(chǎn)生蒸汽后10分鐘，關(guān)緊放氣活塞，當(dāng)壓力達(dá)到一個(gè)大氣壓，溫度為121℃時(shí)，即為滅菌開始。控制熱源，維持所需時(shí)間后停止加熱，當(dāng)壓力降至0時(shí)，打開排氣閥和滅菌鍋蓋取出材料。運(yùn)用高壓蒸汽滅菌法必須注意：滅菌是否徹底的一個(gè)重要關(guān)鍵是壓力上升之前，必須先用蒸汽將鍋內(nèi)的冷空氣完全驅(qū)盡，否則，壓力表指向15磅/英寸²時(shí)，鍋內(nèi)溫度卻還只有100℃,往往會(huì)造成滅菌不徹底；滅菌結(jié)束，一定要待壓力降為0磅時(shí)，才能打開鍋蓋；鍋內(nèi)物品不宜放得太擠，以免影響蒸汽的流通和滅菌效果。②間歇滅菌法：即常壓蒸汽滅菌法。適用于在100℃以上時(shí)容易被破壞的培養(yǎng)基的滅菌。間歇滅菌的溫度和時(shí)間是100℃、30分鐘。在此溫度和時(shí)間內(nèi)能夠殺滅一切細(xì)菌的營(yíng)養(yǎng)體，但不能殺死芽孢，反復(fù)進(jìn)行時(shí)，則可以在間歇時(shí)間里，使芽孢發(fā)育成營(yíng)養(yǎng)體，最后達(dá)到徹底滅菌的目的。運(yùn)用此法的步驟要求是：將需要滅菌的物品置入滅菌鍋內(nèi)(一般的蒸鍋都可以),加熱至100℃,30分鐘，殺死細(xì)菌營(yíng)養(yǎng)體。冷卻后，置37℃溫箱中過夜，使其中的細(xì)菌芽孢發(fā)育成營(yíng)養(yǎng)體。再以同法加熱，反復(fù)三次，即可殺滅所有的細(xì)菌和芽孢。運(yùn)用間歇滅菌法必須注意：此法使用的工具雖然簡(jiǎn)單，但所需要的時(shí)間長(zhǎng)，一般能用高壓蒸汽法滅菌的，均不采用間歇滅菌法。③干熱滅菌法：最簡(jiǎn)單的干熱滅菌是灼燒法。即利用火焰直接把微生物燒死。此法滅菌迅速徹底，適合于接種環(huán)、試管口的滅菌。實(shí)驗(yàn)室中常用的干熱滅菌法是指用熱空氣滅菌。即把待滅菌的物品均勻地放在恒溫干燥箱內(nèi)，加熱至160—170℃,維持2小時(shí)。操作方法和要求參見使用烘箱、電熱恒溫箱的技能。運(yùn)用此法滅菌必須注意：此法只適宜玻璃器皿、金屬用具等滅菌，含有水份的物質(zhì)如生物培養(yǎng)基等不可用此法滅菌。