指保持微生物(實際指菌株)的生活力和原有性狀的技能。優(yōu)良的菌種如果保藏不好，會引起衰退和死亡，或者污染雜菌，給教學(xué)、生產(chǎn)、科研帶來嚴(yán)重?fù)p失。菌種保藏技能是微生物實驗的基礎(chǔ)內(nèi)容，是生物教師應(yīng)掌握的技能之一。菌種保藏方法有斜面低溫保藏法、液體石蠟保藏法、砂土保藏和冷凍保藏法等。
運用菌種保藏技能的操作方法和要求是：①斜面低溫保藏。將菌種接種在營養(yǎng)豐富的固體培養(yǎng)基上。培養(yǎng)基成分要求：20%馬鈴薯煮出液1000毫升、葡萄糖30克、KH₂pO₄3克、維生素B₁10毫克、MgSO₄1.5克、瓊脂20克。分裝試管，滅菌后稍冷放成斜面，在無菌條件下接入所要保藏的菌種。待菌充分生長后，將試管的棉塞部分用油紙包扎好，移至2—8℃冰箱中保藏。保藏時間依生物的種類而不同。霉菌、放線菌及芽孢菌保存2—4個月，移種一次。酵母菌兩個月移種一次，細(xì)菌最好每個月移種一次。使用斜面低溫保藏必須注意：此法容易使菌株變異，因為培養(yǎng)基的理化特性不是嚴(yán)格恒定的，會使微生物的代謝改變，從而影響微生物的性狀，若菌種是經(jīng)常使用，而且條件不變，可以采用此法。②液體石蠟保藏。又稱礦油保藏。是在要保藏的斜面試管菌種培養(yǎng)物上蓋上一層滅過菌的液體石蠟，以杜絕空氣。液體石蠟要高出斜面的一厘米左右，注入石蠟后的試管放在試管架上在4—15℃的溫度下保藏即可。若儲于冰箱，可使菌種保持較長的存活時間。運用此法必須注意，要選擇干燥場所保藏，保藏期間要定期檢查，培養(yǎng)基露出液面時，要及時補(bǔ)充滅菌的液體石蠟。③砂土保藏。在滅過菌的砂土中接種細(xì)菌的芽孢、放線菌或真菌的孢子懸液，經(jīng)真空干燥后，放在室溫或冰箱中較長時間保存。運用此法必須注意：砂土要選擇不含草根、雜物等有損保藏質(zhì)量的物質(zhì)，砂土的pH適宜中性，經(jīng)60—80目篩子篩過，砂與土的比例在2:1—4:1之間。滅菌后要經(jīng)無菌檢驗合格才可使用。④真空冷凍干燥保藏。是把所要保藏的微生物細(xì)胞懸浮在盛有脫脂牛乳等液體的安瓿瓶中，冷卻結(jié)冰后，在零下20℃左右低溫下抽成真空，使之呈干燥狀態(tài)，密封后在低溫下長期保存。此法特點，是低溫、干燥、真空，使微生物生命活動呈休眠狀態(tài)，能較長時間保藏菌種。